胰蛋白酶大致可以分為兩種，一種是傳統(tǒng)使用的動物源性的胰蛋白酶，主要提取自牛或豬的胰腺組織，其缺點是可能會帶來病毒污染的風(fēng)險；另一種則是非動物源性胰酶，即利用基因重組技術(shù)生產(chǎn)的重組胰蛋白酶。
胰蛋白酶 ：早期的胰蛋白酶在生物制藥的主要應(yīng)用是胰島素的生產(chǎn)，不過很快也在其他領(lǐng)域發(fā)光發(fā)熱。動物源的胰蛋白酶具有極大的潛在風(fēng)險，其自身可能攜帶大量可感染人的病毒， 例如：瘋牛病的牛帶有的BSE病毒，豬的口蹄疫病毒，可在人和動物之間傳播的禽類的流感病毒等。
重組胰蛋白酶 ：重組胰蛋白酶是一種使用基因工程技術(shù)生產(chǎn)的酶。在整個生產(chǎn)流程中，嚴格避免了使用任何動物源性原材料，解決了傳統(tǒng)使用的豬或牛胰蛋白酶可能帶來病毒污染的風(fēng)險，確保了重組胰蛋白酶產(chǎn)品的安全性、高純度及超高比活等特性。是生物藥及科研領(lǐng)域不可缺少的工具酶。
重組熱穩(wěn)定胰蛋白酶
冀百康生物全新推出的重組熱穩(wěn)定胰蛋白酶，是通過畢赤酵母的表達系統(tǒng)，經(jīng)發(fā)酵培養(yǎng)、分離純化，再經(jīng)冷凍干燥得到的重組熱穩(wěn)定胰蛋白酶粉末。不含DFP、PMSF和TLCK等酶抑制劑，具有與天然胰蛋白酶相同的活性和特異性。與重組豬胰蛋白酶等不同，該重組熱穩(wěn)定胰蛋白酶不易自切，配制為細胞消化液后可在2-8℃穩(wěn)定存放30天，可完美規(guī)避在使用重組胰蛋白酶過程中反復(fù)凍融而造成的損耗。TrypRE select(1×)（重組熱穩(wěn)定胰蛋白酶消化液）更是可在2-8℃條件下可保存24個月。
產(chǎn)品優(yōu)勢：
1、不易自切，穩(wěn)定性較高；
2、避免反復(fù)凍融造成的損耗；
3、對細胞作用溫和：細胞毒性小，可保持細胞健康；
4、合規(guī)性：生產(chǎn)設(shè)備和生產(chǎn)環(huán)境符合相關(guān)法規(guī)要求，符合GMP指導(dǎo)原則。
科普 —— “不易自切”
不易自切是指重組熱穩(wěn)定胰蛋白酶在催化蛋白質(zhì)水解反應(yīng)過程中，相較于傳統(tǒng)胰蛋白酶，不容易發(fā)生自我水解作用，從而避免了自身蛋白分子的快速降解。這種特性使得重組熱穩(wěn)定胰蛋白酶在保持酶活力和穩(wěn)定性方面具有顯著優(yōu)勢，尤其是在長時間儲存和反復(fù)凍融過程中，能夠最大程度地減少酶活性的損失。
與常見酶液對比
重組熱穩(wěn)定胰蛋白酶在細胞培養(yǎng)中的應(yīng)用
在細胞培養(yǎng)過程中，重組熱穩(wěn)定胰蛋白酶的高比活性能顯著提高細胞消化的效率。使用重組熱穩(wěn)定胰蛋白酶對貼壁細胞進行處理，能夠快速水解細胞間的沾粘蛋白，釋放出單個獨立細胞。與此同時，重組熱穩(wěn)定胰蛋白酶不易自切的特性，使得其在細胞消化過程中能更溫和地作用，降低對細胞造成的傷害，有效避免外源性病毒和內(nèi)毒素的污染，從而不會影響細胞傳代，保持了高細胞活力和細胞產(chǎn)量。
*細胞傳代示意圖
（來源：醫(yī)健速知《細胞傳代詳細步驟》）
推薦在實際應(yīng)用中的使用步驟：
1）使用前將TrypRE select(1×)和完全生長培養(yǎng)基預(yù)熱至37℃。隨后，吸出并丟棄用過的培養(yǎng)基；
2）用5ml不含Ca2+和Mg2+的DPBS緩沖液清洗細胞，隨后吸出并丟棄；
3）加入適量體積TrypRE select(1×)到培養(yǎng)瓶，確保TrypRE select(1×)完全覆蓋細胞；
4）在37℃下孵育，直至細胞脫落。使用倒置顯微鏡觀察細胞，以確保細胞從培養(yǎng)瓶表面完全脫落；
5）加入5-10ml預(yù)熱的完全培養(yǎng)基到培養(yǎng)瓶，傾斜培養(yǎng)瓶直到徹底沖洗培養(yǎng)瓶，將細胞懸液轉(zhuǎn)移至15ml錐形管中，100×g離心5-10min；
6）丟棄上清液，并用2-5ml預(yù)熱的完全培養(yǎng)基重懸細胞沉淀；
7）根據(jù)您的細胞類型，根據(jù)正常方案接種、孵育和繼代培養(yǎng)。
重組熱穩(wěn)定胰蛋白酶有許多潛在用途，包括用于生物藥物生產(chǎn)，如胰島素等。重組熱穩(wěn)定胰蛋白酶解決了傳統(tǒng)使用的豬或牛胰蛋白酶可能帶來病毒污染的風(fēng)險是生物藥及科研領(lǐng)域是不可缺少的工具酶。
產(chǎn)品參數(shù)
訂購規(guī)格
珠海冀百康生物科技有限公司成立于2015年，擁有前沿的合成生物學(xué)創(chuàng)新技術(shù)，專注于“高活性生物原料”與“高端生物制藥”兩大核心領(lǐng)域。產(chǎn)品主要應(yīng)用在抗體、疫苗、蛋白類、核酸類藥物的生產(chǎn)以及細胞培養(yǎng)、人造肉、功效護膚和醫(yī)美領(lǐng)域。冀百康生物擁有4000多㎡符合國際GMP標準的生產(chǎn)車間， 超2噸的生物發(fā)酵罐；行業(yè)的競爭力主要體現(xiàn)在：研發(fā)創(chuàng)新能力強，客戶服務(wù)系統(tǒng)完善，給品牌客戶提供完整的解決方案及CDMO/ODM服務(wù)。
參考文獻：
1、知網(wǎng) [1]楊霽菡.胰蛋白酶自切規(guī)律的解析及抗自切改造[D].天津科技大學(xué),2016.DOI:10.27359/d.cnki.gtqgu.2016.000036
2、來源：冷春生, 崔航, 李淑楠 . 重組酶在胰島素生產(chǎn)中的應(yīng)用[J]. 中國藥學(xué)(英文版), 2014, 23(5): 335-337.
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