賴(lài)氨酰內(nèi)切酶(LaiAnXianNeiQieMei)又稱(chēng)賴(lài)氨酰肽鏈內(nèi)切酶Lys-C 內(nèi)切酶,是一種絲氨酸蛋白酶,開(kāi)始是由Masaki等人從土壤細(xì)菌中發(fā)現(xiàn)并分離得到。該酶具有高度特異性,可特異性切割賴(lài)氨酸殘基和 S-氨乙基半胱氨酸殘基羧基端的肽鍵。也有報(bào)道稱(chēng)具有微量的非特異性切割。該酶是蛋白質(zhì)序列分析和生物制品生產(chǎn)中非常珍貴的工具酶。該酶可單獨(dú)使用,也可以與其它蛋白酶一起使用,經(jīng)過(guò)消化的蛋白可用于肽圖譜分析以及目的蛋白的制備。本品是從重組大腸桿菌中分離純化,再經(jīng)冷凍干燥得到的重組賴(lài)氨酰內(nèi)切酶粉末。
本品屬于生物化學(xué)級(jí)別的基因工程酶,不含DFP、PMSF和TLCK等酶抑制劑,具有天然賴(lài)氨酰內(nèi)切酶相同的活力和特異性。
無(wú)動(dòng)物源性:無(wú)動(dòng)物病毒、無(wú)致病物質(zhì)、無(wú)外源因子污染,安全性高。
純度高:比活高;宿主蛋白殘留小于生物制品限度要求。
生產(chǎn)規(guī)模 1000L 以上。
合規(guī)性:生產(chǎn)設(shè)備和生產(chǎn)環(huán)境符合相關(guān)法規(guī)要求,符合 GMP 指導(dǎo)原則。
質(zhì)量文件完整:按客戶(hù)需求,可提供相關(guān)法規(guī)支持文件。
產(chǎn)品中文名同義詞:胞內(nèi)蛋白酶賴(lài)氨酸-C、重組無(wú)色桿菌蛋白酶、重組賴(lài)氨酰內(nèi)膚酶
注意事項(xiàng)與免責(zé)聲明
在2M尿素或0.1%SDS可保留大部分活力。
本品具有吸潮性,應(yīng)室溫平衡后再取用。
本品僅供研究使用,不得用于動(dòng)物或人類(lèi)的診斷或治療。
運(yùn)輸和儲(chǔ)存穩(wěn)定性
運(yùn)輸穩(wěn)定性:冰袋保溫運(yùn)輸,活性穩(wěn)定。
儲(chǔ)存穩(wěn)定性:凍干粉在-15~-20℃條件下至少能穩(wěn)定存放24個(gè)月。1mM鹽酸或50mM醋酸溶解后儲(chǔ)存于-15~-20℃,反復(fù)凍融10次,無(wú)活性損失。溶解后2~8℃保存建議不超過(guò)7天,溶解后-15~-20℃保存建議不超過(guò)30天。
推薦使用方法
蛋白質(zhì)的準(zhǔn)備 將蛋白質(zhì)溶解在 25mM Tris-HCl,pH9.2 的溶液中。溶解性低或者需要變性處理的蛋白質(zhì)可以用最小體積的 變性劑,如 8M 尿素或 6M 鹽酸胍,在 25℃~37℃條件下孵育1h使之溶解。需要做二硫鍵還原處理的蛋白質(zhì) 可以加入終濃度為 5mM的DTT或β-巰基乙醇,于50~60℃孵育20分鐘使之溶解。調(diào)整反應(yīng)溶液體積使Tris-HCl為25mM,尿素為1M或更低,鹽酸胍為0.1M或更低。
酶液準(zhǔn)備 稱(chēng)取所需的酶粉,用 25mM Tris-HCl (pH 9.2)溶解,使酶液濃度為 1~10mg/ml。
消化反應(yīng) 1g多肽或蛋白質(zhì)推薦酶的用量在1~100AU之間。推薦于25~37℃,反應(yīng) 2~18h。如果需要終止反應(yīng),可以加入乙酸或鹽酸調(diào)節(jié)pH至酸性。
持續(xù)更新中......
白色或類(lèi)白色凍干粉
≥2.5AU/mg pro.
29.2 kDa±2.9kDa
單一主條帶(SDS-PAGE)
30%~70%
≤100ng/mg pro.
≤100ng/mg pro.
8.5~9.5
在緩沖液中溶解性良好
* 實(shí)際核心參數(shù)以產(chǎn)品每批次COA為準(zhǔn);