TrypRE select(1×)是畢赤酵母(Pichia Pastoris)基因工程菌株,經(jīng)發(fā)酵培養(yǎng)、分離純化、配制而得到的重組熱穩(wěn)定胰蛋白酶消化液。TrypRE select是一種非動(dòng)物源性重組酶,可用于解離多種貼壁哺乳動(dòng)物細(xì)胞,包括CHO、HEK 293、A529、原代人角質(zhì)化細(xì)胞和胚胎干細(xì)胞。本品所用的重組酶是來(lái)源于尖孢鐮孢(Fusarium oxysporum)的胰蛋白酶樣蛋白酶,是一種絲氨酸蛋白酶,能選擇地水解蛋白質(zhì)中由賴(lài)氨酸或精氨酸的羧基末端所構(gòu)成的肽鏈,具有重組豬胰蛋白酶、重組牛胰蛋白酶相同的酶學(xué)性質(zhì)。
TrypRE select(1×)在細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中已被證明可以有效地解離含血清和不含血清培養(yǎng)的貼壁細(xì)胞,具有與重組豬胰蛋白酶相似的消化特性。與重組豬胰蛋白酶等不同,TrypRE select(1×)不易自切,可在2-8℃、室溫下穩(wěn)定存放,使用方便。
用于各種類(lèi)型的細(xì)胞消化
與普通胰蛋白酶和其他解離試劑相比,TrypRE select(1×)具有以下特點(diǎn):
無(wú)動(dòng)物源性:無(wú)動(dòng)物病毒、無(wú)致病物質(zhì)、無(wú)外源因子污染,安全性高。
在室溫下穩(wěn)定:使用方便。
對(duì)細(xì)胞作用溫和:細(xì)胞毒性小,可保持細(xì)胞健康。
合規(guī)性:生產(chǎn)設(shè)備和生產(chǎn)環(huán)境符合相關(guān)法規(guī)要求,符合 GMP 指導(dǎo)原則。
質(zhì)量文件完整:按客戶(hù)需求,可提供相關(guān)法規(guī)支持文件
產(chǎn)品中文名同義詞:重組胰蛋白酶消化液
注意事項(xiàng)與免責(zé)聲明
本品開(kāi)瓶后應(yīng)盡快使用,保存過(guò)程中應(yīng)防止微生物污染。
本品僅供科研生產(chǎn)使用,不得用于人體。
運(yùn)輸和儲(chǔ)存穩(wěn)定性
運(yùn)輸穩(wěn)定性:冰袋保溫運(yùn)輸,活性穩(wěn)定。
儲(chǔ)存穩(wěn)定性:儲(chǔ)存穩(wěn)定性:在2-8℃、密封、避光條件下可保存24個(gè)月,也可在-15℃及以下、密封、避光條件下保存24個(gè)月。在室溫、密封、避光條件下可保存1個(gè)月。
推薦使用方法
1)使用前將TrypRE select(1×)和完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基預(yù)熱至37℃。最大限度地減少停留時(shí)間。
2)吸出并丟棄用過(guò)的培養(yǎng)基。
3)用5ml不含鈣和鎂的DPBS緩沖液清洗細(xì)胞。吸出并丟棄。
4)加入適量體積TrypRE select(1×)到培養(yǎng)瓶(如5ml到75ml培養(yǎng)瓶),確保TrypRE select(1×)完全覆蓋細(xì)胞。
5)在37℃下孵育,直至細(xì)胞脫落。使用倒置顯微鏡觀(guān)察細(xì)胞,以確保細(xì)胞從培養(yǎng)瓶表面完全脫落。如有必要,輕輕敲擊培養(yǎng)瓶以去除細(xì)胞。
6)加入5-10ml預(yù)熱的完全培養(yǎng)基到培養(yǎng)瓶。傾斜培養(yǎng)瓶直到徹底沖洗培養(yǎng)瓶。將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至15ml錐形管中。
7)100×g離心5-10min。
8)丟棄上清液,并用2-5ml預(yù)熱的完全培養(yǎng)基重懸細(xì)胞沉淀。
9)使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)器確定活細(xì)胞密度和存活率。
10)根據(jù)您的細(xì)胞類(lèi)型,根據(jù)正常方案接種、孵育和繼代培養(yǎng)。
持續(xù)更新中......
畢赤酵母
無(wú)色澄明溶液
≥200 USP units/ml
280-300mOsm/kg
7.0-7.4
≤1.0EU/ml
陰性
* 實(shí)際核心參數(shù)以產(chǎn)品每批次COA為準(zhǔn);